細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)交流之細(xì)胞培養(yǎng)儀器及功能簡介
時間：2021/8/16 10:35:46
準(zhǔn)備區(qū)的主要功能是進(jìn)行清洗、消毒、準(zhǔn)備工作；制備區(qū)主要是用來進(jìn)行培養(yǎng)基、試劑配置；貯存區(qū)則是用于細(xì)胞庫及物品存放；無菌區(qū)是實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行更衣緩沖及操作培養(yǎng)的地方。而細(xì)胞培養(yǎng)過程中就功能分類又可以劃分為細(xì)胞培養(yǎng)、貯存、配液和滅菌4個部分。
細(xì)胞間的組成一般分為準(zhǔn)備區(qū)，制備區(qū)，貯存區(qū)和無菌區(qū)4個區(qū)域。
準(zhǔn)備區(qū)的主要功能是進(jìn)行清洗、消毒、準(zhǔn)備工作；制備區(qū)主要是用來進(jìn)行培養(yǎng)基、試劑配置；貯存區(qū)則是用于細(xì)胞庫及物品存放；無菌區(qū)是實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行更衣緩沖及操作培養(yǎng)的地方。而細(xì)胞培養(yǎng)過程中就功能分類又可以劃分為細(xì)胞培養(yǎng)、貯存、配液和滅菌4個部分。
一.細(xì)胞培養(yǎng)儀器及簡介
【1.超凈工作臺】
細(xì)胞培養(yǎng)一般采用垂直流超凈工作臺，正壓狀態(tài)，氣體外泄，只保護(hù)操作對象，而不保護(hù)工作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。
紫外照射實(shí)現(xiàn)殺菌功能，紫外滅菌（表面）+臭氧滅菌（死角，擋板關(guān)閉），每次紫外照射20-30min，鼓風(fēng)10min后使用（注意培養(yǎng)室換風(fēng)），潔凈度達(dá)到百級。
紫外燈在3000小時后功率會將至原來的70%，及時更換上方的粗濾布定期拆下清洗。
【2.生物安全柜】
負(fù)壓狀態(tài)，氣體不外泄，既保護(hù)樣品，更側(cè)重于保護(hù)操作人員和環(huán)境，二級安全細(xì)胞，攜帶病毒（如hele/kB），原代培養(yǎng)的臨床人源樣本（真菌），慢病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
【3.CO2鋼瓶】
CO2鋼瓶主要用于CO2氣體的貯存。在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中大多數(shù)細(xì)胞都是需要在CO2含量為5%的條件下進(jìn)行的，CO2鋼瓶主要連接培養(yǎng)箱用于CO2含量的穩(wěn)定維持。
【4.倒置顯微鏡】
倒置式顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室日常工作常規(guī)必備設(shè)備，主要用于日常了解細(xì)胞的生長情況并觀察有染發(fā)生，如資金允許，建議選用配置有照相系統(tǒng)的相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等，可隨時拍攝并記錄細(xì)胞生長情況。
【5.臺式離心機(jī)】
離心機(jī)是利用離心力對混合液（含有固形物）進(jìn)行分離和沉淀的一種專用儀器，主要用與制備細(xì)胞懸液、調(diào)整細(xì)胞密度、洗滌和收集細(xì)胞。細(xì)胞培養(yǎng)中的離心速率一般為300xg(約1000rpm),5-10min,過高的轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡。根據(jù)不同需求，有大容量、可調(diào)溫度離心機(jī)、高速離心機(jī)和低溫冷凍離心機(jī)等更多功能離心機(jī)可選擇。
【6.CO2培養(yǎng)箱】
CO2是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，是細(xì)胞生長的必需成分，又與維持培養(yǎng)液的PH相關(guān)。細(xì)胞培養(yǎng)中，O2、CO2都是細(xì)胞生長的必要條件，CO2培養(yǎng)箱有干式與濕式，培養(yǎng)條件一般設(shè)置為37℃，5%CO2。CO2培養(yǎng)箱水盤的水防止污染的方式采用無菌水+定期2周更換+防腐劑（0.02%疊氮鈉或者2%硫酸銅。
【7.細(xì)胞計(jì)數(shù)板（器）】
細(xì)胞計(jì)數(shù)器是集計(jì)數(shù)、統(tǒng)計(jì)、顯示為一體的微電腦控制的計(jì)數(shù)儀器、計(jì)數(shù)可靠、使用方便。
【8.移液器】
移液器的主要作用是在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中進(jìn)行培養(yǎng)基等液體的吸取和移除。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中用到的主要量程由10ul/100ul/200ul/1000ul組成。
準(zhǔn)備區(qū)的主要功能是進(jìn)行清洗、消毒、準(zhǔn)備工作；制備區(qū)主要是用來進(jìn)行培養(yǎng)基、試劑配置；貯存區(qū)則是用于細(xì)胞庫及物品存放；無菌區(qū)是實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行更衣緩沖及操作培養(yǎng)的地方。而細(xì)胞培養(yǎng)過程中就功能分類又可以劃分為細(xì)胞培養(yǎng)、貯存、配液和滅菌4個部分。
一.細(xì)胞培養(yǎng)儀器及簡介
【1.超凈工作臺】
細(xì)胞培養(yǎng)一般采用垂直流超凈工作臺，正壓狀態(tài)，氣體外泄，只保護(hù)操作對象，而不保護(hù)工作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。
紫外照射實(shí)現(xiàn)殺菌功能，紫外滅菌（表面）+臭氧滅菌（死角，擋板關(guān)閉），每次紫外照射20-30min，鼓風(fēng)10min后使用（注意培養(yǎng)室換風(fēng)），潔凈度達(dá)到百級。
紫外燈在3000小時后功率會將至原來的70%，及時更換上方的粗濾布定期拆下清洗。
負(fù)壓狀態(tài)，氣體不外泄，既保護(hù)樣品，更側(cè)重于保護(hù)操作人員和環(huán)境，二級安全細(xì)胞，攜帶病毒（如hele/kB），原代培養(yǎng)的臨床人源樣本（真菌），慢病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
【3.CO2鋼瓶】
CO2鋼瓶主要用于CO2氣體的貯存。在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中大多數(shù)細(xì)胞都是需要在CO2含量為5%的條件下進(jìn)行的，CO2鋼瓶主要連接培養(yǎng)箱用于CO2含量的穩(wěn)定維持。
【4.倒置顯微鏡】
倒置式顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室日常工作常規(guī)必備設(shè)備，主要用于日常了解細(xì)胞的生長情況并觀察有染發(fā)生，如資金允許，建議選用配置有照相系統(tǒng)的相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等，可隨時拍攝并記錄細(xì)胞生長情況。
【5.臺式離心機(jī)】
離心機(jī)是利用離心力對混合液（含有固形物）進(jìn)行分離和沉淀的一種專用儀器，主要用與制備細(xì)胞懸液、調(diào)整細(xì)胞密度、洗滌和收集細(xì)胞。細(xì)胞培養(yǎng)中的離心速率一般為300xg(約1000rpm),5-10min,過高的轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡。根據(jù)不同需求，有大容量、可調(diào)溫度離心機(jī)、高速離心機(jī)和低溫冷凍離心機(jī)等更多功能離心機(jī)可選擇。
【6.CO2培養(yǎng)箱】
CO2是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，是細(xì)胞生長的必需成分，又與維持培養(yǎng)液的PH相關(guān)。細(xì)胞培養(yǎng)中，O2、CO2都是細(xì)胞生長的必要條件，CO2培養(yǎng)箱有干式與濕式，培養(yǎng)條件一般設(shè)置為37℃，5%CO2。CO2培養(yǎng)箱水盤的水防止污染的方式采用無菌水+定期2周更換+防腐劑（0.02%疊氮鈉或者2%硫酸銅。
【7.細(xì)胞計(jì)數(shù)板（器）】
細(xì)胞計(jì)數(shù)器是集計(jì)數(shù)、統(tǒng)計(jì)、顯示為一體的微電腦控制的計(jì)數(shù)儀器、計(jì)數(shù)可靠、使用方便。
【8.移液器】
移液器的主要作用是在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中進(jìn)行培養(yǎng)基等液體的吸取和移除。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中用到的主要量程由10ul/100ul/200ul/1000ul組成。
